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液相色譜流動相溶劑如何選擇

更新時間:2023-07-07 點擊次數(shù):1318


01

流動相在液相色譜中扮演的角色

目標(biāo)化合物在液相色譜中的保留取決于該物質(zhì)與流動相和固定相間的作用強(qiáng)度。流動相是整個液相色譜分離過程中的“血液",它對組分有親和力,并參與固定相對組分的競爭,因此流動相的選擇直接影響組分的分離度。

02

流動相選擇原則

1

適用性

用作流動相的溶劑應(yīng)與固定相不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性。

2

純度

流動相所用溶劑應(yīng)有高純度,以防流動相中的雜質(zhì)在色譜柱上積累,致使柱性能下降。

3

檢測背景值

譬如使用紫外檢測器時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收或吸收很??;當(dāng)使用示差檢測器時,應(yīng)選擇折射率與樣品差別較大的溶劑作為流動相。

4

粘度與沸點

溶劑的粘度和沸點要適當(dāng)。

使用低粘度溶劑可以減少溶質(zhì)的傳質(zhì)阻力,有利于提高柱效,但如yi醚等溶劑也不宜使用,因為粘度過低的溶劑容易在色譜柱或檢測器內(nèi)形成氣泡,影響分離。而粘度高溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓升高,分離時間延長。

對于制備和純化樣品所用的流動相最好選用沸點較低的溶劑,這樣易用蒸餾等方法把溶劑從柱后收集液中去除,有利于樣品的純化。

5

對樣品的溶解度

如果流動相對樣品的溶解度較差,樣品會在色譜柱柱頭沉積,導(dǎo)致柱效下降。

6

毒性

應(yīng)盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,減少環(huán)境污染和確保實驗人員的安全。

03

常用的流動相

反相色譜是大多數(shù)樣品分析的shou選分離模式,該模式一般比其他液相色譜模式的普適性更好、更方便、更容易獲得令人滿意的分離效果。在反相色譜中,一般使用非極性/弱極性鍵合固定相色譜柱,如C18柱、苯基柱等。

流動相的選擇通常以水相(包括加入一定量的酸、堿、無機(jī)鹽緩沖液等)做基礎(chǔ)溶劑,再加入一定量的能與水互溶的如甲醇(質(zhì)子給體)、乙腈(質(zhì)子受體)、四氫呋喃(偶極溶劑)等極性溶劑,其極性及其K值(分配系數(shù))和分離選擇性有顯著影響。下表列出一些常用溶劑的極性參數(shù)p’。

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04

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