在HPLC中，流動(dòng)相是純?nèi)軇┗蛘呋旌先軇┮约皫в泄腆w改性劑的溶劑。色譜工作者可以針對(duì)HPLC的不同應(yīng)用在數(shù)百種溶劑中進(jìn)行選擇。溶劑的選擇要考慮諸多因素，如溶劑的粘度、折射率、腐蝕性、透明度等，還有商業(yè)價(jià)格。流動(dòng)相的溶劑強(qiáng)度或有機(jī)溶劑百分比可控制分析物的保留時(shí)間。

1、什么是流動(dòng)相

流動(dòng)相是使分析物通過(guò)色譜柱的溶劑。分析物存在于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，在樣品制備后注入色譜柱系統(tǒng)。該溶劑不被視為新基質(zhì)，因?yàn)樗粫?huì)干擾分析?？梢栽跇悠分苽溥^(guò)程中選擇分析物的載體的性質(zhì)，以滿足特定要求，例如揮發(fā)性和與HPLC中流動(dòng)相的混溶性。在反相色譜柱中，流動(dòng)相比固定相更具極性。一般來(lái)說(shuō)極性流動(dòng)相是shou選，因?yàn)榉蛛x效果表現(xiàn)出更好的重現(xiàn)性。

分析物在流動(dòng)相中的溶解度在色譜柱中也起著重要作用。對(duì)于溶于水或部分水性溶劑的化合物，選擇反相HPLC不是問(wèn)題，但對(duì)于不溶于極性溶劑的化合物，通常需要使用正相色譜柱。樣品極性，固定相極性和流動(dòng)相極性的評(píng)估對(duì)于色譜柱的選擇也很重要。

2、流動(dòng)相的一般選擇要求

純度

所有溶劑都應(yīng)該具有最高的純度和質(zhì)量。HPLC級(jí)溶劑經(jīng)過(guò)預(yù)過(guò)濾和純化，在紫外線下具有最小的吸光度。因此，他們不含會(huì)在色譜圖基線中產(chǎn)生假峰的雜質(zhì)。緩沖液制備中使用的水具有最高純度。去離子水通常含有痕量有機(jī)化合物，因此不推薦用于HPLC。

粘度

為了保持可接受的壓降（＜2500psi）和合理的流過(guò)HPLC色譜柱的流速，流動(dòng)相粘度應(yīng)盡可能低。較低粘度的流動(dòng)相產(chǎn)生狹窄的色譜峰。例如乙腈通常是反相HPLC的shou選溶劑，因?yàn)樗粌H粘度低于甲醇或異丙醇，而且具有良好的保留特性。

沸點(diǎn)

如果涉及樣品回收，沸點(diǎn)很重要，低沸點(diǎn)溶劑更容易從樣品中去除。

無(wú)腐蝕性

溶劑必須對(duì)HPLC系統(tǒng)組件無(wú)腐蝕性。

混溶性

并非所有HPLC溶劑都可混溶。如果混合了不能混合的溶劑可能會(huì)導(dǎo)致一些問(wèn)題，例如不穩(wěn)定的基線，波動(dòng)的壓力等。異丙醇可與大多數(shù)常見(jiàn)的HPLC溶劑混溶。因此，在不確定最后使用的溶劑系統(tǒng)的情況下，它可以用來(lái)沖洗HPLC的流路