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細(xì)節(jié)決定shu贏,流速?zèng)Q定成敗

更新時(shí)間:2022-12-01 點(diǎn)擊次數(shù):1012

固相萃取柱(英文,簡(jiǎn)稱SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,簡(jiǎn)稱SPE cartridges)是從層析柱發(fā)展而來的一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。主要應(yīng)用于各種食品、農(nóng)畜產(chǎn)品、環(huán)境樣品以及生物樣品中目標(biāo)化合物的樣品前處理。固相萃取技術(shù)已經(jīng)被廣泛地使用在許多國(guó)標(biāo)(GB/T)以及行業(yè)分析標(biāo)準(zhǔn)中。

SPE技術(shù)基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離、凈化,是一種包括液相和固相物理萃取過程。利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑,保留其中被測(cè)物質(zhì),再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì),然后用少量溶劑迅速洗脫被測(cè)物質(zhì),從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì),而讓被測(cè)物質(zhì)流出;或同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測(cè)物質(zhì),再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測(cè)物質(zhì)。

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SPE由于多種不可控原因影響,如填料選擇、樣品處理、過柱流速、洗脫溶劑等,都會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)效果不佳或者實(shí)驗(yàn)成本加大,在SPE的使用當(dāng)中,每一步顯而易見的都離不開流速,特別是上樣、淋洗、洗脫等步驟控制流速尤為重要,但過柱流速卻往往被大多實(shí)驗(yàn)人員忽略。

SPE的流速快慢不一,填料量、緊密度、溶劑極性又或者樣品粘度等因素都會(huì)影響流速的快慢。流速較慢會(huì)大大延長(zhǎng)前處理時(shí)間,特別是大批樣品處理時(shí),這會(huì)讓很多人苦惱不堪,這時(shí)可以選擇為固相萃取小柱增加負(fù)壓,從而加快流速,使時(shí)間成本大大降低。既然流速慢會(huì)影響時(shí)間成本,那么是不是越快越好呢?當(dāng)然不是!這是很多人的誤區(qū),流速太快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留,也會(huì)極大影響溶劑與目標(biāo)化合物或者填料的相互作用,從而影響保留或者洗脫過程(可對(duì)比圖2、圖3)。可以在上樣、淋洗、洗脫等過程中適當(dāng)降低流速,通常而言,流速低于5mL/min時(shí)結(jié)果較為穩(wěn)定,部分實(shí)驗(yàn)可能需要更慢的流速。

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固相萃取柱是由重力自然滴落,加上批次可能存在一定差異,所以小柱的自然流速可能存在一定差異,會(huì)存在較快或較慢的情況,單靠小柱是無法控制的,這個(gè)時(shí)候就需要用到固相萃取裝置輔助,月旭固相萃取裝置,自帶調(diào)節(jié)閥及壓力泵口,輕松掌控流速,操作簡(jiǎn)便,一次可上多個(gè)樣品,匹配通用轉(zhuǎn)接頭,適用于市面上大多SPE及免疫親和柱,前處理好幫手之名當(dāng)仁不讓。

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