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一種更高效的層析方法--MMC

更新時間:2021-12-23 點(diǎn)擊次數(shù):3572

MMC概述


混合模式層析(mixed-mode chromatography,MMC)對功能配基的結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),組合兩種或以上的相互作用模式,加強(qiáng)對目標(biāo)蛋白的親和性和選擇性,從而提高純化效率。與傳統(tǒng)的IEC和HIC相比,新型層析模式MMC具有高載量、高選擇性和高效率等優(yōu)勢。

MMC特點(diǎn)

MMC配基與目標(biāo)蛋白之間存在多種相互作用模式,包括疏水作用、靜電作用以及氫鍵作用等。

MMC介質(zhì)的配基密度較高,且具有非鹽依賴吸附特性,并可通過調(diào)節(jié)pH來實(shí)現(xiàn)蛋白的有效洗脫。

蛋白可與MMC介質(zhì)所偶聯(lián)的疏水基團(tuán)和離子交換基團(tuán)共同作用:當(dāng)離子強(qiáng)度較低時,靜電相互作用起主導(dǎo)作用;當(dāng)離子強(qiáng)度較高時,則疏水相互作用占據(jù)主導(dǎo)作用;中等離子強(qiáng)度時,疏水和靜電可能共同作用。

蛋白的洗脫通常有兩個途徑:當(dāng)以疏水結(jié)合為主導(dǎo)時可以通過降低洗脫液pH,通過蛋白和配基之間的靜電排斥作用來實(shí)現(xiàn)洗脫;當(dāng)靜電結(jié)合為主導(dǎo)時,則可通過增加離子強(qiáng)度從而減弱靜電相互作用,實(shí)現(xiàn)蛋白的洗脫。

月旭科技現(xiàn)有兩種復(fù)合型配基,MMC與MIX A,以下是產(chǎn)品的技術(shù)參數(shù):

Solid MMC 復(fù)合型弱陽離子交換介質(zhì)


微信截圖_20211223165223.png

應(yīng)用實(shí)例


層析柱:TXK 50/30;

介質(zhì)類型:Solid MMC;

樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;

平衡緩沖液:0.4M NaCl,20mM PB,pH6.5;

洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM PB,pH6.5。


微信截圖_20211223165301.png

微信截圖_20211223165315.png

應(yīng)用實(shí)例


層析柱:TXK 50/30

介質(zhì)類型:Solid MiX A;

樣品:300M重組蛋白畢赤酵母發(fā)酵液;

平衡緩沖液:0.1M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0;

洗脫緩沖液:1.5M NaCl,20mM磷酸緩沖液,pH7.0。



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